缺血性脑卒中患者外周血CBX7的表达水平变化及其通过Nrf2/HO-1通路对神经元凋亡的影响

摘要

目的 探讨Polycomb chromobox7(CBX7)对氧糖剥夺/再灌注(Oxygen-glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)神经元的影响及其可能的作用机制.方法 收集缺血性脑卒中(Ischemic stroke,IS)组患者和体检健康人群(对照组)外周血,分离外周血单个核细胞;大鼠海马神经元OGD/R处理后细胞转染CBX7特异性siRNA(OGD/R+si-CBX7组)及其阴性对照(OGD/R+NC组).此外,设置Zinc Protoporphy-rin(ZnPP)干扰组(OGD/R+si-CBX7+ZnPP组)及对照组.逆转录-聚合酶链反应(Reverse transcription-pol-ymerase chain reaction,RT-PCR)检测细胞中CBX7 mRNA表达水平;Western blot检测细胞中CBX7,Bcl-2关联X的蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和核因子E2相关因子2(Nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)/血红素加氧酶-1(Heme oxygenase-1,HO-1)通路相关蛋白的表达水平;CCK-8试剂盒检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡.结果 与对照组比较,IS组外周血CBX7 mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05).与对照组比较,OGD/R组细胞中CBX7 mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P<0.05),细胞凋亡率和Bax蛋白表达水平明显升高(P<0.05),细胞增殖能力(24、48和72 h)、Bcl-2,Nrf2和HO-1蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与OGD/R+NC组比较,OGD/R+si-CBX7组细胞中CBX7 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05),细胞凋亡率和Bax蛋白表达水平明显降低(P<0.05),细胞增殖能力(48和72 h)、Bcl-2,Nrf2和HO-1蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与OGD/R+si-CBX7组比较,OGD/R+si-CBX7+ZnPP组细胞增殖能力(24、48和72 h)明显降低(P<0.05),细胞凋亡率和Bax蛋白表达水平明显升高(P<0.05),Bcl-2,Nrf2和HO-1蛋白表达水平明显降低(P<0.05).结论 敲低CBX7可能是通过激活Nrf2/HO-1通路来抑制OGD/R神经元凋亡.