高效液相柱前衍生化法和高效液相荧光法测定栀子厚朴汤4种生物碱的比较

摘要

目的 建立高效液相柱前衍生化法和高效液相荧光法测定栀子厚朴汤中4个生物碱,并比较两种方法优缺点.方法 ①高效液相柱前衍生化法:采用色谱柱Lichrospher C18(250mm×4.6mm,5μm),以甲醇-水(57:43)为流动相;流速:1.0mL·min-1;紫外检测器:257nm.②高效液相荧光法:采用色谱柱Lichrospher C18(250mm×4.6mm,5μm),以[10mM己烷磺酸钠用磷酸调节pH至2.5]-甲醇(85:15)为流动相;流速为1.0mL·min-1;荧光检测器:激发波长为281nm;发射波长为302nm.结果 ①高效液相柱前衍生化法:4个生物碱的线性范围为0.05～5μg·mL-1(r≥0.9994),平均回收率在96.2%～98.8%之间(RSD≤3.4%).②高效液相荧光法:4个生物碱的线性范围为0.025～1μg·mL-1(r≥0.9998),平均回收率在100.0%～101.4%之间(RSD≤3.0%).两种方法比较:从方法准确性、专属性、系统适应性、样品处理、峰面积的响应、检测限和定量限、流动相和色谱分离角度进行全面评价.结论 两种方法准确、专属、灵敏,可用于栀子厚朴汤中4个生物碱的含量测定.与高效液相柱前衍生化法相比,高效液相荧光法更简单,灵敏度更高.