甜瓜蛋白激酶类基因CmPKC的克隆、表达及遗传转化分析

摘要

[目的]本文研究了蛋白激酶类基因在甜瓜白粉病抗性中的抗性机理.[方法]以不同抗性的甜瓜为材料,根据植物蛋白激酶类基的同源序列设计引物,采用RT-PCR方法获得该基因的中间部分序列,通过RACE法获得cDNA完整序列,将其命名为CmPKC.[结果]该基因全长约为2914 bp,开放阅读框为2493 bp,编码831个氨基酸.蛋白序列进化分析表明,CmPKC蛋白与香瓜蛋白激酶同源性最高.实时荧光定量PCR分析表明在不同抗性材料上相对表达量变化趋势不同,在抗性材料上表达丰度出现的时间较感病材料早,且在不同材料上相对表达量变化趋势与已报道的一个甜瓜感病相关MLO家族基因一致,推测所获得的基因也可能与感病相关,且属于早期应答基因;转基因烟草鉴定初步表明该基因可能还参与生长发育过程,具有促进开花的功能.[结论]将为更加深入探索其功能及在白粉病抗性通路中及生长发育过程中所起的作用奠定基础.