hper1基因3'端UTR区双荧光素酶报告系统构建

摘要

目的:构建hper1基因3'端UTR区双荧光素酶报告系统pmiR-RB-REPORTTM-hper1-3 'UTR (PMIR-3'UTR),检测其表达,为研究hper1基因的表达调控及microRNA调控靶基因的结合位点提供基础平台.方法:用PCR扩增的方法提取hper1基因3'UTR序列,并连接至pmiR-RB-REPORTTM (PMIR)双荧光素酶报告载体的多克隆位点,测序验证插入序列并转染入A549细胞检测其荧光素酶活性.结果:测序结果表明PMIR-3'UTR的插入序列正确,在转染入A549细胞后其荧光素酶能正常表达.结论:PMIR-3' UTR双荧光素酶报告系统构建成功.