加环引物LAMP法快速检测布鲁氏杆菌方法的研究

摘要

研究以布鲁氏杆菌保守的OMP25蛋白基因为靶基因,设计了6条LAMP特异性引物,同时探讨了加环引物对LAMP的影响,通过优化LAMP体系的反应条件,建立了一套快速检测布鲁氏杆菌的新方法.LAMP扩增产物可通过凝胶电泳和荧光显色进行判定.该研究比较了LAMP法和加环引物LAMP法的灵敏度,并检测了其引物特异性.试验结果显示,普通LAMP法的灵敏度为20 CFU/mL,加环引物的LAMP法的灵敏度为2.0 CFU/mL.通过两种方法的比较可知:LAMP法可以快速、直观、准确地检测布鲁氏杆菌,加环引物可进一步提高LAMP的扩增效率,是一种在基层现场有广泛应用前景的检测方法.