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lncRNA TDRG1、miR-194-3p在直肠癌组织中的表达变化及其对直肠癌细胞凋亡和放疗敏感性影响观察

         

摘要

目的 观察长链非编码RNA睾丸发育相关基因1(lncRNA TDRG1)、微小RNA-194-3p(miR-194-3p)在直肠癌组织中的表达变化,及其对直肠癌细胞凋亡、放疗敏感性的影响.方法 收集直肠癌组织及癌旁组织,采用RT-qPCR法检测直肠癌组织及癌旁组织中lncRNA TDRG1、miR-194-3p.使用LncBase Predicted v.2在线预测网站分析lncRNA TDRG1的靶基因,采用双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA TDRG1的靶基因.取人直肠癌细胞系SW1643分别转染si-TDRG1、si-NC、miR-194-3p mimics、miR-NC、si-TDRG1+ anti-miR-194-3p、si-TDRG1+anti-miRNC,记为si-TDRG1组、si-NC组、miR-194-3p组、miR-NC组、si-TDRG1+ anti-miR-194-3p组、si-TDRG1+ anti-miR-NC组,采用流式细胞术测算各组细胞凋亡率,采用Western blotting法检测各组细胞中Bcl-2、Bax蛋白表达,采用克隆形成实验测算各组细胞放疗敏感性[以细胞存活分数、放射增敏比(SER)表示].结果 直肠癌组织中lncRNATDRG1的相对表达量高于癌旁组织,miR-194-3p的相对表达量低于癌旁组织(P均<0.05).转染WT-TDRG1、miR-194-3pmimics的SW1643细胞荧光素酶活性低于转染WT-TDRG1、miR-NC的SW1643细胞(P<0.05).si-TDRG1组细胞凋亡率高于si-NC组,miR-194-3p组细胞凋亡率高于miR-NC组,si-TDRG1+ anti-miR-194-3p组细胞凋亡率低于si-TDRG1+ anti-miR-NC组(P均<0.05).si-TDRG1组Bcl-2蛋白相对表达量低于si-NC组,Bax蛋白相对表达量高于si-NC组(P<0.05);miR-194-3p组Bcl-2蛋白相对表达量低于miR-NC组,Bax蛋白相对表达量高于miR-NC组;si-TDRG1+ anti-miR-194-3p组Bcl-2蛋白相对表达量高于si-TDRG1+ anti-miR-NC组,Bax蛋白相对表达量低于si-TDRG1+ anti-miR-NC组(P均<0.05).si-TDRG1组、si-NC组细胞存活分数分别为0.330、0.657,SER为2.016;miR-194-3p组、miR-NC组细胞存活分数分别为0.370、0.669,SER为1.913;si-TDRG1+ anti-miR-194-3p组、si-TDRG1+ anti-miR-NC组细胞存活分数分别为0.547、0.320,SER为0.574.结论 直肠癌组织中lncRNATDRG1高表达、miR-194-3p低表达;干扰lncRNA TDRG1可能是通过靶向miR-194-3p促进直肠癌细胞凋亡、提高放疗敏感性.

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