MK886对人结肠癌细胞 HT-29增殖及 Ascl2表达的影响

摘要

目的：探讨5-脂氧合酶活化蛋白（ FLAP）抑制剂MK886对人结肠癌细胞HT-29增殖的影响及其作用机制。方法分别采用12．5、25、50、75、100、200μmol／L的MK886干预体外培养的HT-29细胞，分别于干预24、48 h时采用CCK-8法测定细胞增殖抑制率，结果显示MK886抑制HT-29细胞增殖最佳作用时间为48 h、最佳浓度为48．12μmol／L。选择48．12μmol／L MK886干预HT-29细胞（MK886组），另设对照组（不干预），干预24 h时采用Real-time PCR技术检测Ascl2 mRNA表达，干预24、48、72 h时分别采用Western blotting 法检测 Ascl2 mRNA和蛋白表达。结果经过48．12μmol／L MK886干预24 h时HT-29细胞中Ascl2 mRNA相对表达量为0．35±0．02，对照组为0．72±0．02，两组比较P＜0．01。48．12μmol／L MK886作用24、48、72 h时HT-29细胞中Ascl2蛋白相对表达量分别为1．75±0．13、1．10±0．15、0．71±0．19，均较对照组降低（ P均＜0．05）；且随着MK886作用时间延长， Ascl2蛋白相对表达量逐渐下调（P均＜0．05）。结论 FLAP抑制剂MK886能抑制人结肠癌细胞HT-29增殖，其机制可能与下调Ascl2 mRNA和蛋白表达有关。