低氧预处理脂肪间充质干细胞移植对小鼠心肌梗死后心肌细胞凋亡及血管新生的影响

摘要

目的 探讨低氧预处理脂肪间充质干细胞(ADSCs)移植对小鼠心肌梗死后细胞凋亡及新生血管形成的作用及机制.方法 原代分离培养并鉴定小鼠ADSCs,取第3代ADSCs分为低氧组和常氧组分别置于低氧(2％O2)和常氧(21％O 2)环境中孵育6 d,观察低氧和常氧培养的ADSCs标志蛋白及Ki67表达,实时荧光定量PCR技术检测低氧和常氧培养ADSCs血管内皮生长因子(VEGF)、肝细胞生长因子(HGF)、胎盘生长因子(PLGF)mRNA表达.采用结扎左前降支方法制备32只C57B/L小鼠心肌梗死模型,随机分成假手术组、模型组、常氧ADSCs移植组和低氧ADSCs移植组,两移植组在小鼠心肌梗死区边缘分别注射常氧细胞或低氧预处理细胞,于注射后4周采用免疫荧光法检测小鼠心肌细胞凋亡及血管再生情况.结果 低氧组和常氧组细胞符合ADSCs特性,低氧组ADSCs Ki67表达阳性率高于常氧组(P<0.05),低氧组ADSCs PLGF、HGF、VEGF mRNA相对表达量均高于常氧组(P均<0.05).细胞移植后4周,与模型组相比,ADSCs移植组小鼠心肌梗死区边缘caspase-3阳性凋亡细胞数降低,vwF阳性血管内皮细胞数升高,以低氧ADSCs移植组改变最明显(P均<0.05).结论 低氧预处理ADSCs移植能下调小鼠心肌梗死周边细胞凋亡反应,促进组织血管再生,其机制为低氧预处理能提升ADSCs的分泌功能.