银杏叶提取物EGB761对缺氧心肌细胞凋亡的保护作用及分子机制研究

摘要

目的:研究银杏叶提取物EGB761对缺氧原代乳鼠心肌细胞凋亡相关基因的影响及分子机制.方法:大鼠乳鼠1 d提取心肌原代细胞培养,分对照组、缺氧组、缺氧+EGB7615μg/ml组、缺氧+EGB76110μg/ml组、缺氧+EGB76120μg/ml组,M T T法检测细胞存活率、ELISA法检测细胞上清LDH及细胞匀浆中SOD的活性变化、Hoechst染色检测细胞凋亡情况、PCR及Western-blot法检测PPAR-γ、NF-κB-p65、I-κB、Bax、Bcl-2、Caspase-3 mRNA及蛋白表达.结果:和对照组相比,缺氧6 h时细胞存活率明显下降,且随着加入EGB761浓度增加,细胞存活率逐渐升高.EGB761(10μg/ml和20μg/ml浓度)可有效降低(P<0.05)缺氧造成的LDH漏出和凋亡增加,不同浓度EGB761均可升高细胞内SOD活性(P<0.05).缺氧造成PPAR-γ、I-kb、抗凋亡因子Bcl-2表达下降;N F-κB-p65基因、促凋亡因子Bax、Caspase-3表达上升,不同浓度的EGB761可逆转缺氧引起的相关因子表达变化(P<0.05).结论:银杏叶提取物EGB761可调控PPAR-γ、NF-κB-p65及凋亡关键基因的表达,并逆转缺氧引起的心肌细胞凋亡增加、存活率下降等损伤效应.