慢生型大豆根瘤菌(Bradyrhizobiurm japonicurm)USDA110菌株3-羟丁酸脱氢酶基因(bdhA)的克隆、序列及特性

摘要

通过功能互补试验,从慢生型大豆根瘤菌USDA110菌株基因文库中筛选到能互补广宿主根瘤菌NGR234的bdhA突变体菌株NGRPA2和苜蓿根瘤菌的bdhA突变体菌株Rm11107、使之恢复Hbu+表型的克隆;经酶活测定和Southern杂交证明该克隆含有bdhA基因.测定了bdhA基因全序列,并在GenBank登记(登记号为:AY077581).该基因由789个碱基对组成,编码分子量为27.59 ku、含262个氨基酸残基的3-羟基丁酸脱氢酶.在该基因的开放阅读框内插入interposon ΩKm,并通过同源重组构建了Bradyrhizobium japonicum bdhA突变体(bdhA::ΩKm).植株试验未显示bdhA基因的突变对结瘤、固氮有明显影响.