表达猪带绦虫六钩蚴TSOL18抗原的重组活载体疫苗株的构建

摘要

[目的]构建表达猪带绦虫六钩蚴TSOL18抗原的重组鼠伤寒沙门氏菌活载体疫苗株.[方法]克隆并改造TSOL18基因,构建重组质粒pYA3341-TSOL18,电转入鼠伤寒沙门氏菌终宿主菌株X4550,体外鉴定重组菌X4550 (pYA3341-TSOL18)表达蛋白的免疫原性、稳定性、生长曲线、安全性和小鼠免疫试验进行评价.[结果]酶切鉴定和基因序列测定证实重组质粒构建成功;尿素-SDS-PAGE检测有目的蛋白条带,Western Blot 证实该抗原具有免疫原性; 重组菌株在体外营养选择压力下可稳定地携带重组质粒传代繁殖;蛋白的表达对重组菌株的生长基本没有影响;小鼠实验证实重组菌安全可靠,二免后 ELISA 检测产生抗体.[结论]成功构建了能稳定表达rSOL18蛋白的可口服减毒鼠伤寒沙门氏菌疫苗株 X4550 (pYA3341-TSOL18).