发芽糙米中粗多糖的纯化及分子量测定

摘要

本文对发芽糙米粗多糖进行纯化,通过比较活性炭吸附法、过氧化氢氧化法、大孔树脂吸附法三种方法的脱色效果,以及Sevage法、三氯乙酸法、酶与Sevage结合方法三种方法的脱蛋白效果,筛选出发芽糙米粗多糖脱色、脱蛋白的最佳方法.分别比较了DEAE-Sepharose CL-6B、DEAE Fast Flow、DEAE Sepharose 52三种柱层析填料对糙米粗多糖的层析纯化效果,筛选出最优填料.并对纯化后的发芽糙米多糖各组分进行分子量的测定.结果 表明:大孔树脂AB-8对发芽糙米粗多糖脱色效果最佳,脱色率为86.57％,多糖损失率为28.96％.酶-Sevage法脱蛋白效果较好,且多糖损失率低,脱蛋白率为74.36％,多糖损失率为14.09％.对发芽糙米多糖进行柱层析的最佳填料为DEAE-Sepharose CL-6B.根据线性回归方程计算其平均分子量,水洗多糖组分的平均分子量为1.47×105 Da,盐洗多糖组分的平均分子量分别为9.62×105、5.59×106、3.15×105 Da.结论:确定了针对发芽糙米粗多糖的去除蛋白质和脱色的方法,并筛选出最佳的柱层析填料,分离出四个组分发芽糙米多糖,为发芽糙米粗多糖的提取、纯化、分离逐渐转变为工业化生产提供了理论基础.