一株产普鲁兰酶菌株的筛选鉴定、酶学性质及海带多糖酶解产物的抗氧化活性

摘要

本研究从连云港海泥中筛选产普鲁兰酶菌株,利用形态学、生理生化特征、基因序列(16S rRNA和gyrB)进行分析鉴定.利用产酶菌株发酵制备普鲁兰酶,初步纯化后分析其酶学性质.利用该普鲁兰酶粗提物对海带多糖进行水解,并对其水解产物进行抗氧化活性分析.结果表明:筛选得到一株产普鲁兰酶的巨大芽孢杆菌P6(Bacillus megaterium),经发酵纯化后普鲁兰酶比活力为62.3 U/mg,分子量约为43 kDa.该酶的最适反应温度为45℃,最适pH为6.5,在温度40℃下保温5 h,相对残余酶活达95％以上,而60℃下保温1h,酶全部失活.在pH6～7.5之间保温12 h后,该酶仍有40％以上的相对残余酶活.DPPH和·OH自由基清除实验表明:海带多糖经普鲁兰酶水解后抗氧化活性显著增强(p＜0.05),为普鲁兰酶在食品工业中的应用研究提供了新的方向.