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兔抗Red蛋白抗血清的纯化及MC3T3细胞中Red蛋白表达时相的分析

     

摘要

为了纯化兔抗Red蛋白的3种多克隆抗体,并用其研究Red蛋白在真核细胞中的表达时相,首先于30℃培养了不含目的基因的空载体(pDH2)大肠菌,经彻底裂菌后用丙酮沉淀全菌蛋白,用其在不同时间吸附3种待纯化的Red抗体,然后用间接ELISA法及Western-blot法检测了3种抗体的效价和特异性.最后用纯化后的3种Red抗体检测三顺反子表达载体pCMV-gIbIx的3种蛋白表达产物在MC3T3细胞中的表达时相.ELISA及Western-blot检测结果表明:3种抗血清经纯化后特异性好且效价没有受到影响,随后用纯化的抗体成功地研究了Red基因在真核细胞中的表达时相,此结果为Red重组系统在真核生物基因功能的研究中提供了必要的条件.

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