HeLa/GFP-α-tubulin/GFP-CENP-A细胞系的构建及对其有丝分裂的观察

摘要

有丝分裂中染色体的正确排列及准确地分离依赖于一系列的分子调控机制;其中微管的精确组装与运动发挥着重要的调控作用.微管功能调控异常可导致基因组不稳定性,从而促进肿瘤的发生;同时许多以微管为靶点的抗肿瘤药物被临床广泛应用.为了在细胞水平更好地研究微管的作用机制,利用慢病毒系统构建了稳定表达绿色荧光蛋白GFP-tubulinα及GFP-cenp A的HeLa细胞系,通过实时成像的激光共聚焦显微镜,实现了对HeLa细胞在有丝分裂期微管运动的动态观察,为研究肿瘤的发生机制及抗肿瘤药物的作用机理提供了实验基础.