ARHI通过Wnt/自噬通路调控口腔鳞癌细胞凋亡的研究

摘要

目的 探讨Aplasia-Ras同源物成员I(ARHI)在口腔鳞癌(OSCC)中的表达情况,并验证ARHI能否通过Wnt信号通路调控OSCC细胞凋亡.方法 通过生物信息学方法整合GEO数据库中OSCC芯片(GSE75540和GSE9844),免疫组化方法检测20例OSCC和癌旁健康组织中ARHI的表达,并用GEPIA和UAL-CAN数据库评价ARHI在头颈部鳞癌的表达和预后.过表达ARHI后的OSCC细胞(CAL-27以及SCC-115)用CCK-8以及AO/EB方法检测其细胞增殖活性和凋亡情况,通过Western blot以及LC3荧光染色检测过表达AR-HI后OSCC细胞(CAL-27、SCC-115)Wnt信号通路相关蛋白以及OSCC细胞自噬的情况.结果 GEO口腔鳞癌芯片数据分析结果显示,ARHI在OSCC组织中表达明显下调;生物信息学结果显示,ARHI在头颈部鳞癌中表达降低;20例免疫组化结果显示,ARHI在OSCC组织中的表达降低.OSCC患者的生存曲线分析显示,ARHI的表达水平与OSCC患者的预后相关.过表达ARHI能够很大程度地抑制OSCC细胞(CAL-27、SCC-115)的增殖活性,同时诱导OSCC细胞凋亡.在OSCC细胞中过表达ARHI后,Cleaved-caspase-3、Caspase-3及Bax的表达明显升高,β-catenin蛋白表达降低,GSK-3β表达升高.过表达ARHI后,OSCC细胞(CAL-27、SCC-115)中自噬小体明显增多,且自噬相关蛋白beclin-1表达升高,LC3II/I表达升高.结论 ARHI在OSCC组织中低表达,且过表达ARHI能够通过经典Wnt信号通路诱导OSCC细胞发生自噬与凋亡.ARHI可能是OSCC潜在的治疗靶点和预后标志物.