肿瘤浸润性淋巴细胞亚群的功能研究及其受体克隆

摘要

目的 比较肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)各亚群体外特异性杀伤肿瘤功能,摸索TIL细胞表面受体(TCR)互补决定区3(CDR3)基因体外扩增的方法,为寻找TIL细胞中肿瘤特异性抗原受体奠定前期实验基础.方法 从肺癌肿瘤组织中分离出TIL细胞,利用CD8、PD-1抗体将TIL细胞分群,实时无标记细胞功能分析技术(real time cellular anal-ysis,RTCA)分析比较各亚群细胞特异性杀伤活性.利用巢式RT-PCR的方法建立TCR VαCDR3区基因体外扩增的方法.结果 TIL细胞中CD3+CD8+(CTL)细胞亚群占75.7％,PD-1的表达约为29.7％;CD8+PD-1+TIL细胞亚群比CD8+PD-1-TIL细胞具有更强的体外杀伤原代肿瘤细胞功能;巢式RT-PCR成功扩增出TCR Vα1CDR3区基因片段.结论 CD8+PD-1+TIL细胞亚群具有较强的特异性杀伤肿瘤活性;建立了通过巢式RT-PCR体外成功获取TCR所有CDR3区基因片段的实验条件.