从烟草丛顶病病原复合物中分离烟草扭脉病毒的方法

摘要

烟草丛顶病是由烟草丛顶病毒(TBTV)、烟草丛顶病毒类似卫星RNA(Sat-TBTV)、烟草扭脉病毒(TVDV)和烟草扭脉病毒相关RNA(TVDVaRNA)复合侵染引起的一类特殊病害,目前尚不清楚这些病原物各自在病害症状形成和病害传播中的作用.本文根据蚜虫传播烟草丛预病复合病原物传毒特性的差异,探索了3种分离TVDV的生物学方法.方法A为将获得了烟草丛顶病复合病原物的蚜虫饥饿24 h后,以单虫单苗的方式接到健康烟株上传毒,24 h后灭虫.方法B为将无毒蚜虫饥饿2～4 h后转接到感病烟株上饲毒48 h,再以单虫单苗的方式接到健康烟株上传毒,24 h后灭虫.方法C为将无毒蚜虫于感病烟株上饲毒48 h后,以单虫单苗的方式接到健康烟株上传毒24 h,此后每隔24 h将蚜虫移到另一健康烟株上传毒,直到蚜虫死亡.其中方法A和B均可将TVDV从烟草丛顶病病原复合体中分开,方法A操作简单、分离周期短且TVDV的分离效率高.单独TVDV侵染的烟株无明显的丛顶症状,叶片靠近主脉的地方会出现皱缩,生长后期叶片变得细长且顶端会发生扭曲.本试验可为研究TVDV与其他病原物、寄主植物和传播介体的相互作用提供很好的试验材料,也可为蚜虫传播的复合侵染病毒的生物学分离提供参考.