小麦条锈菌hsp70基因的克隆及热胁迫下的表达特征分析

摘要

为明确热激蛋白70在小麦条锈菌对高温适应性中的作用,采用RACE和PCR技术扩增得到小麦条锈菌hsp70的基因全长,并利用实时荧光定量PCR技术对热胁迫下不同温度敏感类型小麦奈锈菌中hsp70的表达特征进行分析.克隆得到的小麦条锈菌hsp70基因组序列全长为2 817 bp,包含7个内含子,cDNA序列全长为2 267 bp,其中开放阅读框为1 917 bp,编码639个氨基酸,分子量为66.7 ku,等电点为5.15.编码蛋白含3个保守的HSP70氨基酸序列.qRT-PCR试验结果表明,28℃热激后,hsp70的转录水平随热激时间的延长而略有增加,2h达到最高值.不同温度敏感类型菌株在热激2h后hsp70的相对表达量具有显著差异.低敏感类型菌株hsp70平均表达量为未经处理对照的7.12倍,而高敏感类型菌株hsp70平均表达量仅为对照的1.63倍.