薄层层析和反相高效液相色谱检测木瓜蛋白酶催化合成的Aspartame及其中间产物

摘要

本文报道以TLC和HPLC法检测以木瓜蛋白酶在水-乙酸乙酯两相反应体系中合成的Aspartame及其中间产物（I）（Ⅱ）。TLC条件为：展开剂（正丁醇：冰醋酸：水=3：1：1），展开时间（4-5h)，检测（荧光检测253.7nm，1%茚三酮丙酮溶液显色）。HPLC条件为：流动相（乙腈：水=45：55），流速1ml/min，检测（紫外检测260nm)，进样量20ul,灵敏度6，纸速1-4mm/min，分析周期10min。该方法简便、准确、灵敏度高。用该方法也证实以木瓜蛋白酶催化合成的Aspartame及其中间产物（Ⅱ）与以嗜热蛋白酶（Thermolysin)催化合成的Aspartame及其中间产物（Cbz-Asp-PheOMe)完全一致。