PKC通过对MPF活性的影响在G2/M期调节细胞周期进程

摘要

为了研究PKC在NIH3T3细胞中G2/M期作用,检测了PKC的激动剂1-oleoty-2-acetyl-sn-glycerol(OAG)对G2/M期关键的调控因子MPF活性变化及细胞周期进程的影响.细胞同步化处理用Aphidicolin.用PI(PropidiumIodide)染料与DNA结合,流式细胞仪检测细胞周期的改变.同时测定OAG加入后G2期PKC和MPF的活性改变.结果表明Aphidicolin同步在G1/S期的细胞,释放后在经过1-2h的恢复期后,约在7h左右到达早G2期,并在10h达到G2末期.OAG在浓度为50μmol/L,100μmol/L,150μmol/L时都可激活PKC,而CalphostinC在300nmol/L时最大限度地抑制PKC活性.50μmol/L的OAG至少1150 sec没有改变细胞内钙.50μmol/L的OAG在G2期使MPF活性降低,而300nmol/L calphostin C可以使MPF活性升高.在G2早期加入OAG50μmol/L可以引起NIH3T3细胞阻滞在G2/M期交界.