有机汞化合物对木瓜蛋白酶的失活机理研究

摘要

cqvip:复合食品包装材料残存的痕量重金属结合物严重威胁消费者健康。为了探明重金属结合物对生物大分子的影响及作用机理,研究了一定浓度的有机汞化合物(对氯汞苯甲酸,CMBA)使木瓜蛋白酶失活前后,该木瓜蛋白酶的结构变化。结果表明,经浓度为1×10^-4mol/L的CMBA处理后,木瓜蛋白酶的二级结构变化明显,其α-螺旋结构质量分数从43.4%急剧减少至4.2%,β-折叠、β-转角和无规卷曲质量分数从12.7%、16.0%和27.2%分别提高至40.0%、19.6%和36.2%,该酶二级结构成分由α+β型绝大部分转变为全β型。CMBA分子诱导木瓜蛋白酶L-链的α-螺旋结构趋向离散,构象松散,致使其天然构象遭到破坏,木瓜蛋白酶失活。经CMBA处理后的木瓜蛋白酶,其荧光光谱最大吸收峰红移7nm,荧光强度降低显著,这是由色氨酸(Trp)残基被包埋在极性亲水环境下引起的。分子对接结果表明CMBA结合到木瓜蛋白酶的疏水活性口袋内,可与其中的甘氨酸(Gly)66形成氢键,与Trp26形成疏水键,该结果与光谱分析结果相一致。