敲低癌相关成纤维细胞HSF1基因对口腔鳞癌细胞裸鼠皮下成瘤的影响

摘要

目的:探讨癌相关成纤维细胞(CAFs)中热休克因子1(HSF1)基因对口腔鳞癌(OSCC)细胞裸鼠皮下移植瘤生长和转移的影响.方法:采用Western blot鉴定体外分离培养的OSCC组织及癌旁组织成纤维细胞,以获取CAFs;采用慢病毒敲低CAFs中的HSF1,构建CAFs?shHSF1细胞(实验组)和CAFs?shNC细胞(对照组);将肿瘤细胞Cal27分别与CAFs?shHSF1细胞和CAFs?shNC细胞按1:1混匀,接种于裸鼠腋下,观察成瘤情况及移植瘤生长变化,分析体质量和瘤体体积差异,HE染色和免疫组化染色观察移植瘤转移以及上皮间质转化(EMT)情况.结果:OSCC组织成纤维细胞中α?平滑肌肌动蛋白(α?SMA)、成纤维细胞活化蛋白(FAP)和成纤维细胞特异蛋白?1(FSP?1)等CAFs标记物的蛋白丰度较癌旁组织成纤维细胞明显升高.实验组裸鼠的肿瘤体积明显低于对照组(P0.05);实验组肝转移瘤数目少于对照组(P<0.05);与对照组比较,实验组移植瘤α?SMA和波形蛋白免疫组化染色减弱,上皮细胞钙粘蛋白染色无明显改变.结论:敲低CAFs中的HSF1基因能够显著抑制OSCC细胞裸鼠移植瘤的生长和转移,可能通过部分EMT机制发挥作用.