姜黄素-生物素偶联物的合成和口腔鳞癌细胞姜黄素结合蛋白的分离

摘要

cqvip:目的:利用姜黄素-生物素亲和素技术分离鉴定口腔鳞癌细胞中潜在的姜黄素靶向蛋白。方法:利用化学合成的方法合成姜黄素-生物素偶联物,利用姜黄素-生物素与链霉亲和素的结合放大技术和聚丙烯酰胺凝胶电泳分离口腔鳞癌细胞中潜在的姜黄素结合蛋白,液相质谱和串联质谱分析筛选分离口腔鳞癌细胞中姜黄素靶向蛋白。姜黄素-生物素亲和素结合实验和Western blotting进一步鉴定姜黄素结合蛋白。结果:与姜黄素对比,合成的姜黄素-生物素偶联物活性并没有显著影响,且化学性质稳定。姜黄素-生物素-链霉亲和素的结合放大技术和聚丙烯酰胺凝胶电泳成功地分离出潜在的姜黄素结合蛋白,液相色谱和串联质谱分析之后,搜索引擎检索蛋白数据库筛选出167个潜在的姜黄素结合蛋白,其中一些和肿瘤的发生密切相关。进一步的蛋白结合实验和Western blotting验证Annexin A2和CDKN2B为姜黄素在口腔鳞癌细胞内的结合蛋白,并呈一定的剂量依赖关系。结论:Annexin A2和CDKN2B可能是姜黄素在口腔鳞癌细胞潜在的靶向蛋白。