上调miRNA-145表达对非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡及放射敏感性的影响

摘要

目的 探讨上调miRNA-145表达对非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡及放射敏感性的影响.方法 收集人正常肺上皮细胞株BEAS-2B和非小细胞肺癌细胞株A549,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测两种细胞中miRNA-145的相对表达量.以LipofectamineTM2000转染试剂将miRNA-145模拟物和阴性对照质粒转染至A549细胞中,分别作为miRNA-145组和NC组,以只加入转染试剂的A549细胞作为对照组,RT-PCR检测各组细胞中miRNA-145的相对表达量.采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和流式细胞术(FCM)检测上调miRNA-145表达对细胞增殖和凋亡的影响.给予不同放射剂量X线照射后采用克隆形成实验检测细胞的放射敏感性.结果A549细胞中miRNA-145的相对表达量明显低于正常肺上皮BEAS-2B细胞(P﹤0.01);转染后,miRNA-145组细胞中miRNA-145的相对表达量高于对照组(P﹤0.05);转染后,NC组与对照组细胞中miRNA-145的相对表达量比较,差异无统计学意义(P﹥0.05);miRNA-145组细胞转染24、48、72 h的光密度(OD)值均低于对照组(P﹤0.05);转染48 h后,miRNA-145组细胞的凋亡率高于对照组(P﹤0.05);2、4、6、8 Gy剂量的X线照射后miRNA-145组细胞的存活分数(SF)均低于对照组,放射增敏比(SER)为1.491.结论 与正常肺上皮BEAS-2B细胞比较,A549细胞中miRNA-145的相对表达量较低,上调其表达能够抑制A549细胞增殖,促进细胞凋亡,增强放射敏感性.