鲤鱼(Cyprinus carpio L.)GH受体的分子克隆及其两种转录子的发现

摘要

应用反转录-PCR及RACE技术,从二龄鲤鱼肝组织中克隆了生长激素受体(GHR)的全长基因,其开放阅读框编码602个氨基酸,其中包括244个氨基酸的胞外激素结合结构域,24个氨基酸的跨膜区域和334个氨基酸的胞内信号传导区域.序列分析表明:无论在基因水平还是蛋白质水平,鲤鱼GHR与鲫鱼GHR均具有较高的同源性.用一对基因特异性引物在研究二龄鲤鱼GHR的组织分布时发现:肝与其他组织的扩增产物大小不一致(肝组织中的约小100bp),测序结果以及基因组PCR表明这是由于一个97 bp的内含子选择性剪切造成的.而以同样引物在4月龄鲤鱼各组织扩增的片段大小是一致的,且与二龄鲤鱼肝以外组织的扩增产物大小一致.鲤鱼GHR两种转录子的出现,系转录时发生拼接变化所致,推测是一种与发育有关的机制.采用半定量RTPCR方法分析组织相对表达水平,结果显示:GHR在二龄鲤鱼鳃、胸腺、脑组织的表达水平明显低于4月龄鲤鱼.