抗Ⅳ型胶原酶单链抗体对博莱霉素诱导小鼠肺纤维化的防治作用

摘要

目的研究抗Ⅳ型胶原酶单链抗体scFv（3G11）对博莱霉素（BLM）诱导的小鼠肺纤维化的防治作用。方法 C57BL/6小鼠分为空白对照组、盐水对照组、BLM组和低、中、高剂量scFv（3G11）组。BLM组气管内注射BLM 400 ng/g;低、中、高剂量scFv（3G11）组注射BLM当天记为0 d,第1～7天每天腹腔注射scFv（3G11）15、30、45μg/g。第21天处死盐水对照组、BLM组和中剂量scFv（3G11）组小鼠各6只,取左肺行组织病理学观察,并测定肺泡隔面积比和有核细胞计数;另处死空白对照组、盐水对照组、BLM组和低、中、高剂量scFv（3G11）组小鼠各6只,取肺组织测定羟脯氨酸含量以衡量肺胶原沉积状况。取小鼠腹腔巨噬细胞进行原代培养,采用明胶酶谱法观察不同浓度scFv（3G11）（0、15、30、45、60μmol/L）对巨噬细胞分泌基质金属蛋白酶2（MMP-2）和MMP-9的影响。结果组织病理学观察显示scFv（3G11）组小鼠肺纤维化程度明显轻于BLM组,肺泡隔面积比（45.3%±3.2%）和有核细胞计数（451±47）均明显低于BLM组（59.0%±3.0%,599±42,均p＜0.01）。中、高剂量scFv（3G11）组小鼠肺组织羟脯氨酸含量[分别为（0.82±0.05）和（0.80±0.03）μg/mg]明显低于BLM组[（0.92±0.07）μg/mg,P＜0.05,P＜0.01]。明胶酶谱分析显示,scFv（3G11）浓度为15μmol/L时即可抑制巨噬细胞分泌的MMP-2和MMP-9的活性。结论抗Ⅳ型胶原酶单链抗体scFv（3G11）能抑制BLM诱导的小鼠肺纤维化。