二十二碳六烯酸改善棕榈酸诱导的C2C12细胞胰岛素抵抗作用

摘要

目的观察二十二碳六烯酸（DHA）对棕榈酸诱导的C2C12细胞胰岛素抵抗的影响。方法将C2C12细胞诱导分化成熟,加棕榈酸及DHA处理,通过实时聚合酶链反应（real-Time qPCa）及免疫印迹检测C2C12细胞葡萄糖转运体-4（GLUT4）、胰岛素受体-β（IR-β）、胰岛素受体底物-1（IRS-1）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、白细胞介素-6（IL-6）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）表达;谷胱甘肽检测试剂盒检测超氧化物岐化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性,荧光分光光度计检测活性氧（ROS）;[~3H]-2-脱氧-D-葡萄糖检测C2C12细胞葡萄糖摄取量。结果棕榈酸组与对照组比较,磷酸化胰岛素受体底物-1（P-IRS-1）的表达上调[（2.9±0.3）比（1.1±0.1）,P＜0.05];磷酸化胰岛素受体-β（p-IRβ）表达下调[（0.87±0.09）比（1.58±0.21）,P＜0.05];GLUT4表达下调[（1.1±0.3）比（3.3±0.4）,P＜0.05];炎症分子MCP-1、IL-6、iNOS表达明显上升:[MCP-1:（27.2±0.6）比（1.0±0.1）,P＜0.001;IL-6:（94.9±6.5）比（0.8±0.0）,P＜0.001;iNOS:（288.0±15.6）比（1.8±0.6）,P＜0.001]。C2C12细胞氧化应激标志物ROS升高2.1倍（P＜0.05）,SOD、GSH-Px活性分别下降63%及49%（P＜0.05）;DHA组与棕榈酸组比较,p-IRS-1的表达下调[（1.3±0.2）比（2,9±0.3）,P＜0.05],p-IRβ表达上调[（1.3±0.2）比（0.9±0.1）,P＜0.05],GLUT4表达明显升高[（2.8±0.4）比（1.1±0.3）,P＜0.05];炎症分子MCP-1、IL-6、iNOS表达均明显下调[MCP-1:（18.5±0.3）比（27.2±0.6）,P＜0.001;IL-6:（1.7±0.4）比（94.9±6.5）,P＜0.001;iNOS:（5.0±0.9）比（288.0±15.6）,P＜0.001],氧化应激标志物ROS下降55%（P＜0.05）,SOD、GSH-Px活性升高72%及64%（P＜0.05）。结论 DHA通过激活C2C12细胞的胰岛素信号通路,减少细胞的炎症反应及氧化应激而改善胰岛素抵抗。