农杆菌介导的刺芹侧耳遗传转化体系的建立

摘要

以刺芹侧耳菌丝球为受体,潮霉素(Hyg)为筛选标记,应用农杆菌介导法对刺芹侧耳菌丝进行了遗传转化研究.潮霉素敏感性测试结果表明,刺芹侧耳HYg耐受浓度为50mg/L.农杆菌介导的刺芹侧耳菌丝最佳遗传转化体系为:菌液浓度OD600=0.6-0.7,侵染时间30-35min,共培养时间2d,侵染液和共培养培养基中乙酰丁香酮(AS)浓度为1mg/mL;经潮霉素抗性筛选、PCR鉴定和GUS活性的组织化学分析,表明外源基因GUS已转入到刺芹侧耳菌丝中,并获得表达.本实验成功地建立了稳定的农杆菌介导的刺芹侧耳遗传转化体系.