细菌蛋白质组双向电泳中“串联珠”现象初探

摘要

目的初步探讨细菌样品双向电泳中"串联珠"状蛋白点产生的原因。方法通过对比不同样品制备方法对双向电泳胶图的影响,分析"串联珠"状蛋白点出现的条件,并取"串联珠"状蛋白点进行胶内酶解及MALDI-TOF/TOF分析,寻找"串联珠"状蛋白点可能产生的原因。结果以含0.5%SDS的裂解液煮沸菌体的方法制备样品,就会产生"串联珠"状蛋白点。蛋白鉴定结果显示"串联珠"状蛋白点为同一蛋白,MALDI-TOF/TOF一级质谱峰没有出现明显的偏移峰。结论 "串联珠"产生的原因是由于SDS在加热条件下会对蛋白产生修饰或紧密结合作用,特别是相对分子质量较大的酸性蛋白。