长型LRP16基因真核表达载体的构建及在HL60细胞中的表达

摘要

目的:构建长型LRP16基因开放阅读框架序列的真核表达载体,并观察其在髓系白血病细胞系HL60细胞中的表达情况.方法:采用RT-PCR方法自1例健康献血员外周血单个核细胞中克隆长型LRP16 cDNA;将长型LRP16 cDNA克隆入 pGEM-T载体中并进行酶切鉴定和DNA序列测定;将鉴定过的DNA片段插入真核质粒pcDNA3.1(+),构建真核表达载体pcDNA-LLRP16;脂质体介导法将其转染HL60细胞,培养72 h后用RT-PCR方法检测转染细胞中长型LRP16基因的表达情况.结果与结论:酶切鉴定和序列分析证实,重组质粒含有人长型LRP16基因序列;转染实验表明 LRP16基因能在HL60细胞中过表达,为进一步研究长型LRP16基因功能奠定了基础.