siRNA沉默环指蛋白8基因对裸鼠人鼻咽癌移植瘤放疗增敏作用的实验研究

摘要

目的 探讨环指蛋白8(RNF8)的放疗抵抗作用及沉默RNF8后对鼻咽癌的放疗增敏作用及其机制.方法 分别将鼻咽癌CNE?1细胞株及稳定转染的RNF8沉默的CNE?1细胞株注射入裸鼠背部皮下,建立裸鼠鼻咽癌移植瘤模型.将肿瘤长至直径8～10 mm的裸鼠30只按随机数字法分为RNF8未沉默组(RNF8+组)和RNF8沉默组(RNF8-组),每组按放疗照射剂量的不同又分5个亚组,每个亚组3只,分别给予0、4、8、12、16Gy照射,其中0 Gy为对照亚组.采用局部分割照射,每次2 Gy.照射完成10 d后杀鼠取瘤,称重观察抑瘤情况,计算抑瘤率;取2组8Gy剂量亚组肿瘤制成细胞悬液,应用流式细胞仪检测凋亡率,应用流式细胞仪检测2组8 Gy剂量亚组中RNF8和DNA依赖蛋白激酶催化亚单位(DNA?PKcs)、共济失调毛细血管扩张症突变基因(ATM)的表达. 结果 RNF8在RNF8-组中只有微量表达(0.11±0.03),而在RNF8+组中表达明显升高(1.18±0.23),差异有统计学意义(P0.05). 结论 RNF8可以导致鼻咽癌细胞的放疗抵抗,其机制是通过激活以ATM为主的同源重组(HR)途径来修复损伤的肿瘤细胞DNA,沉默RNF8可以增加鼻咽癌的放疗敏感性.