矢车菊素-3-葡萄糖苷促进成骨细胞MC3T3-E1增殖的作用机制

摘要

cqvip:目的探究矢车菊素-3-葡萄糖苷(C3G)促进成骨细胞MC3T3-E1细胞增殖的作用,以及对Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法设置分组为对照组(C3G浓度为0μmol/L)和不同浓度C3G组(25、50、100、200和400μmol/L),在无血清培养基同步化处理后孵育24 h、48 h和72 h,使用MTT法测定细胞增殖率,实时细胞分析(RTCA)术收集96 h内细胞生长产生的电信号绘制时间-细胞指数散点图。另设置分组Wnt-C59-C3G组、DMSO-C3G组、Wnt-C59-对照组和DMSO-对照组,使用Wnt/β-catenin特异性抑制剂预处理4 h,比较C3G在5、10、25、50μmol/L浓度下抑制剂下促成骨细胞增殖作用的变化。使用Western blot测定C3G浓度分别为0μmol/L(对照组)和100μmol/L(C3G组)的组间细胞中β-catenin蛋白水平。结果与对照组相比,各浓度C3G组细胞增殖率提高(P<0.01),其中24 h时各浓度组间增殖率差异达到最大。Wnt-C59抑制剂未对C3G促MC3T3-E1细胞增殖作用产生明显改变,各组间差异具有明显的统计学意义(F=22.913,P<0.001)。Western blot分析显示C3G组与对照组β-catenin蛋白水平差异无统计学意义(P=0.38)。结论C3G可以促进MC3T3-E1细胞增殖,其增殖作用可能未通过Wnt/β-catenin途径。