2型猪链球菌谷氨酸脱氢酶单克隆抗体的制备与鉴定

摘要

目的 制备抗猪链球菌(Streptococcus suis,S. suis)谷氨酸脱氢酶(glutamate dehydrogenase, GDH)的单克隆抗体.方法 分别以2型S. suis全菌细胞和重组GDH蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠;采用淋巴细胞杂交瘤技术将免疫后的小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合;酶联免疫吸附试验(ELISA)筛选分泌抗GDH单克隆抗体的杂交瘤细胞株并克隆化;免疫印迹(Western blot)鉴定GDH单克隆抗体的特异性;制备小鼠腹水并进行抗体效价测定.结果 细胞融合后经ELISA筛选获得分泌的阳性细胞株,经过有限稀释克隆化筛选,获得4株能稳定分泌抗GDH单克隆抗体的杂交瘤细胞株.单抗腹水的抗体效价均在1: 102 400以上.结论 本研究获得了4株能稳定分泌抗体且其分泌的抗体能够与GDH蛋白进行特异性反应的单克隆抗体细胞株,所获得特异性单克隆抗体能用于猪链球菌结构和功能的研究,也能够进一步用于猪链球菌感染血清学诊断方法研究.