不同氧浓度暴露对早产鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的损伤及CGRP的保护效应

摘要

目的 观察不同氧浓度对早产鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞( AECⅡ)的影响以及降钙素基因相关肽(CGRP)对AECⅡ的保护作用. 方法 将原代分离培养的孕19天早产鼠AECⅡ接种至6孔培养板,随机分为空气组、40％氧组、60％氧组、80％氧组及相关浓度氧CGRP组与相关浓度氧CGRP受体拮抗剂组.空气组和高氧组分别置于体积分数为21％的空气或40％、60％、80％的氧气中暴露24 h；CGRP组在暴露前加入CGRP;CGRP拮抗剂组在CGRP组基础上加入CGRP受体拮抗剂(CGRP8-37).培养24h后,用分光光度计测定各组丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(TAOC)、超氧化物歧化酶(SOD)水平；用流式细胞仪检测活性氧(ROS)和细胞凋亡率；用逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)测定表面活性蛋白C(SP-C)的mRNA表达. 结果 与空气组比较,40％、60％、80％氧组MDA、ROS及细胞调亡率均显著增高,TAOC、SOD水平及SP-C mRNA表达均显著降低(P均＜0.01).与氧气组比较,高氧CGRP组细胞MDA、ROS水平及细胞调亡率均显著下降；而TAOC、SOD水平及SP-C mRNA表达均明显增高(P＜0.01).高氧CGRP拮抗剂组与高氧组各指标比较差异均无显著性. 结论 高于40％氧暴露24h可导致早产鼠AECⅡ发生氧化损伤,诱导细胞凋亡及SP-C mRNA表达下降；随着氧浓度增加,损伤加重；而CGRP可部分减轻AECⅡ的氧化损伤,减少凋亡,促进SP-C mRNA表达,对高氧损伤的AECⅡ起保护作用.