天麻素抑制miR-223-3p对肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞损伤的影响

摘要

目的探讨天麻素对肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞增殖、凋亡、炎症反应的影响及其对miR-223-3p的调控作用。方法取正常培养的肺泡上皮细胞A549为对照组,采用肺炎链球菌诱导A549建立肺泡上皮细胞损伤模型为模型组,按照天麻素剂量分为天麻素2.5、5.0、10.0μmol/L组。按照miR-223-3p寡核苷酸抑制物(miR-223-3p inhibitor)及阴性对照序列(anti-miR-NC)转染肺炎链球菌诱导A549细胞,分为miR-223-3p inhibitor组和anti-miR-NC组。然后将miR-223-3p寡核苷酸模拟物(miR-223-3p mimic)及阴性对照mimic NC序列(miR-NC)分别转染至肺炎链球菌诱导的A549细胞后,加入天麻素10.0μmol/L处理细胞并分为miR-NC组,miR-223-3p mimic组。检测各组细胞增殖、凋亡情况及miR-223-3p的表达水平。检测各组白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-6(IL-6)水平及B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)蛋白表达情况。结果与对照组比较,模型组OD值、IL-10及Bcl-2蛋白表达水平降低,细胞凋亡率、IL-6、Bax及miR-223-3p蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,天麻素5.0、10.0μmol/L组OD值、IL-10、Bcl-2蛋白表达水平升高,细胞凋亡率、IL-6、Bax、miR-223-3p蛋白表达水平降低,且呈浓度依赖性,差异有统计学意义(P<0.01)。转染miR-223-3p inhibitor对肺炎链球菌诱导的A549细胞增殖、凋亡及炎症反应的作用与天麻素作用相似;miR-223-3p过表达可明显逆转天麻素对肺炎链球菌诱导的A549细胞增殖、凋亡及炎症反应。结论天麻素可通过下调miR-223-3p的表达而促进A549细胞增殖,并抑制细胞凋亡,减轻炎症反应,从而减轻肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞损伤。