克唑替尼通过PI3K/AKT/mTOR途径抑制肺癌HCC78细胞系迁移的研究

摘要

目的基于PI3K/AKT/mTOR途径探索克唑替尼抑制肺癌细胞系HCC78细胞迁移的分子机制。方法采用MTT法检测细胞增殖抑制情况;Transwell迁移实验检测细胞迁移能力变化;ELISA实验检测细胞基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)分泌变化;细胞免疫组化检测HCC78细胞Snail2含量变化;qPCR检测HCC78细胞E-Cadherin、N-Cadherin的mRNA表达情况;Western bloting检测HCC78细胞对PI3K、AKT、mTOR及p-PI3K、p-AKT、p-mTOR的含量影响。结果克唑替尼可抑制HCC78细胞的增殖,具有时间-浓度依赖性,对HCC78细胞分泌MMP-2、MMP-9的能力具有显著的抑制作用(P<0.05),克唑替尼可抑制HCC78细胞中Snail2的激活,抑制其转录活性,降低HCC78细胞E-Cadherin、N-Cadherin mRNA表达及HCC78细胞内PI3K、AKT、mTOR的磷酸化含量(P<0.05),但并不影响PI3K、AKT、mTOR总蛋白含量。结论克唑替尼可抑制Snail2的表达激活,导致HCC78细胞中E-Cadherin表达上升,N-Cadherin表达下降,并下调HCC78细胞分泌MMP-2和MMP-9的能力,从而抑制HCC78细胞增殖和迁移,而引起上述蛋白表达变化的可能机制是克唑替尼可有效抑制PI3K/AKT/mTOR通路。