DRG神经元P2X3受体在神经病理痛大鼠疾病中的作用及其与磷酸化p38 MAPK的相关性

摘要

目的 探讨背根神经节(DRG)神经元P2X3受体在神经病理痛(NP)大鼠疾病发生和进展中的作用,并分析其与磷酸化丝裂原活化蛋白激酶p38(p38 MAPK)的相关性.方法 60只大鼠采用体质量排序法随机分为假手术组、模型组、P2X3受体拮抗剂组、P2X3受体激动剂组4组,每组各15只.采用坐骨神经缩窄性损伤法建立NP大鼠模型,假手术组仅分离坐骨神经不结扎.建模成功大鼠假手术组14只、模型组12只,分别鞘内注射20 μL无菌生理盐水;P2X3受体拮抗剂组12只,鞘内注射10μL无菌生理盐水+10 μL A-317491;P2X3受体激动剂组13只,鞘内注射10μL无菌生理盐水+10 μL ATP.评估各组大鼠手术前后各时间点热刺激缩足反射潜伏期(PWTL)、机械缩足反射阈值(MWT);检测各组术后7、14 d DRG中P2X3受体、p-p38MAPK蛋白表达情况,并采用Pearson相关性系数法分析P2X3受体与p-p38MAPK的相关性.结果 模型组术后患肢出现明显痛觉过敏体征,P2X3受体激动剂组更为严重,P2X3受体拮抗剂组有所改善.与假手术组比较,模型组、P2X3受体拮抗剂组、P2X3受体激动剂组术后1 d PWTL较术前缩短,且术后1～14 d保持平稳(P＜0.05);与模型组比较,术后1～14 d P2X3受体拮抗剂组PWTL均延长,P2X3受体激动剂组均缩短,但模型组、P2X3受体拮抗剂组、P2X3受体激动组仍短于假手术组(P＜0.05).模型组、P2X3受体拮抗剂组、P2X3受体激动剂组术后1d开始MWT降低,且分别于术后14、7d降至最低(P＜0.05);与模型组比较,术后1～14 d P2X3受体拮抗剂组MWT均升高,P2X3受体激动剂MWT均降低,但模型组、P2X3受体拮抗剂组、P2X3受体激动组仍低于假手术组(P＜0.05).与模型组比较,P2X3受体拮抗剂组术后7、14 d DRG中P2X3受体、p-p38MAPK蛋白相对表达量均降低,P2X3受体激动剂组均升高,但模型组、P2X3受体拮抗剂组、P2X3受体激动组均高于假手术组(P＜0.05).经Pearson相关性分析,术后7、14 d DRG中P2X3受体相对表达量与p-p38MAPK蛋白相对表达量呈正相关(P＜0.001).结论 DRG神经元P2X3受体激活参与促进NP大鼠疾病发生和进展,且P2X3受体激活可促进p38MAPK磷酸化量增多.