真皮来源间充质干细胞的分离培养及成神经分化的研究

摘要

目的:研究真皮来源间充质干细胞的分离培养方法及其向神经细胞分化的条件及可行性.方法:取大鼠真皮组织,采用贴壁传代培养筛选法,分离培养真皮间充质干细胞,流式细胞术检测细胞周期,经β-巯基乙醇诱导, 倒置显微镜下观察细胞形态变化,免疫细胞化学方法对分化细胞进行鉴定.结果:分离的早期贴壁的真皮来源间充质干细胞经过连续传代培养至第4代,细胞形态较为均一,86%的细胞处于G0/G1期,细胞表面波形蛋白表达阳性,但因子Ⅷ和角蛋白表达阴性.经β-巯基乙醇诱导, 真皮间充质干细胞可向神经细胞分化,细胞突起增多,具有神经元的形态学特征,分化后的细胞表达神经元标志物--神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经微丝(NF-200).结论: 大鼠真皮组织中存在着成体多能干细胞,一定条件下可分化为神经元.提示真皮可能是成体多能干细胞的又一来源,有望在神经组织修复和再生中发挥作用.