NIX介导的细胞自噬在低氧诱导ATⅡ凋亡中的作用

摘要

目的 探讨NIX蛋白在低氧诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ)凋亡中的作用.方法 以自噬抑制剂和caspase抑制剂分别预处理人ATⅡ细胞株A549 1 h后,再低氧暴露24 h,Annexin V和碘化丙啶(PI)染色,流式细胞仪检测细胞凋亡.为了分析NIX介导的自噬在低氧诱导的ATⅡ细胞凋亡中的作用,以siRNA沉默NIX表达后,观察低氧暴露后细胞自噬水平的变化(MDC染色观察自噬溶酶体数量、Western blot检测自噬相关蛋白Beclin-1和LC3Ⅱ的表达变化)以及凋亡的变化.结果 低氧诱导的细胞凋亡分别被自噬抑制剂和caspase抑制剂减弱;低氧暴露促进NIX表达并上调细胞自噬水平;沉默NIX能下调细胞自噬水平,减少低氧诱导的细胞凋亡,且作用可被caspase抑制剂减弱,而不被自噬抑制剂减弱.结论 低氧暴露引起NIX蛋白表达而导致其介导的细胞自噬增加,这可能是低氧诱导ATⅡ细胞非caspase依赖性凋亡的机制之一.