钙依赖性酪氨酸激酶在糖尿病心肌纤维化中的作用研究

摘要

目的 研究钙依赖性酪氨酸激酶(Pyk2)在糖尿病大鼠模型中的表达及其与糖尿病心肌纤维化的关系.方法 制备10只糖尿病大鼠模型,饲养12周后行大鼠心肌成纤维细胞原代培养,采用免疫组化法和原位杂交法检测Pyk2蛋白和mRNA的水平,酶联免疫吸附法检测细胞培养上清中Ⅰ、Ⅳ型胶原的含量,激光共聚焦扫描显微镜分析核因子NF-κB的核移位情况.结果 经图像分析,免疫组化法显示实验组中Pyk2蛋白表达明显高于对照组,而原位杂交法检测到实验组中Pyk2 mRNA表达较对照组明显增加.酶联免疫吸附法检测细胞培养上清中Ⅰ、Ⅳ型胶原测得值分别为0.568±0.026和0.385±0.027,显著高于对照组的0.379±0.007和0.281±0.009(P＜0.05).Leica激光共聚焦图像分析软件分析NF-κB核区与胞质区绿色荧光比值发现实验组为4.894±0.263,对照组为1.764±0.102,二者相比有显著性差异.相关分析发现Pyk2表达量、胶原生成量和NF-κB活化呈显著正相关.结论 Pyk2可能在糖尿病心肌纤维化病变中起着重要的作用,这种作用可能是通过促进NF-κB核移位增强胶原合成实现的.