靶向VEGFA调控MAPK/ERK和PI3K/Akt信号通路在结直肠癌血管生成中的作用及机制

摘要

目的:探究靶向血管内皮生长因子A(vascularendothelial growth factor A,VEGFA)调控促分裂原活化的蛋白激酶/细胞外调解蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase/extracellular regulated protein kinase,MAPK/ERK)和磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B,PI3K/Akt)信号通路在结直肠癌血管生成中的作用及机制.方法:收集本院2015年1月-2019年12月82例结直肠癌患者癌组织及癌旁正常组织,使用qRT-PCR检测患者癌组织、癌旁正常组织中VEGFA水平,分析VEGFA水平与患者临床病理特征的关系.将SW480细胞分为五组,分别为对照组(正常人结肠细胞),空白组(无转染质粒),pMIR-miR-29b组(转染miR-29b),MAPK/ERK组(转染miR-29b后添加MAPK/ERK信号通路抑制剂PD98059),PI3K/Akt组(转染miR-29b后添加PI3K/Akt信号通路抑制剂wortmanin).检测各组细胞中VEGFA、MAPK/ERK及PI3K/Akt信号通路靶蛋白ERK、Akt、mTOR、Bcl-2的表达水平.将各组细胞移植至裸鼠,建立结直肠癌裸鼠转移瘤模型,观察各组裸鼠移植瘤生长情况,检测各组裸鼠肿瘤微血管密度变化情况.结果:癌组织VEGFA表达水平高于癌旁正常组织(P<0.05);癌组织内Ⅲ、Ⅳ期患者VEGFA mRNA水平高于Ⅰ、Ⅱ期患者(P<0.05),淋巴结转移患者VEGFA表达水平高于无淋巴结转移患者(P<0.05).与对照组相比,空白组、pMIR-miR-29b组、MAPK/ERK组、PI3K/Akt组VEGFA、ERK、Akt、mTOR、Bcl-2 mRNA及蛋白表达水平均上升(P<0.05).MAPK/ERK组与PI3K/Akt组肿瘤重量、微血管密度均低于空白组(P<0.05),pMIR-miR-29b组裸鼠微血管密度、肿瘤重量均明显低于MAPK/ERK组与PI3K/Akt组(P<0.05).结论:VEGFA可有效下调MAPK/ERK及PI3K/Akt信号通路,从而抑制结肠癌血管新生,为临床治疗结直肠癌提供了新的临床依据.