沉默Ambra1基因增强大肠癌细胞对5-FU的化疗敏感性

摘要

目的:观察5-FU对沉默Ambra1基因的大肠癌细胞的化疗敏感性影响.方法:将靶向Ambra1基因的siRNA转染至大肠癌细胞HCT15和HCT116,用Real-time PCR和Western blotting方法检测Ambra1 mRNA和蛋白的表达;采用MTS方法检测HCT15和HCT116细胞的活力.结果:HCT15、HCT116细胞转染siRNA-Ambra1-1、siRNA-Ambra1-2后的Ambra1 mRNA表达水平均分别低于siRNA-Ambra1-HCT15-NC、siRNA-Ambra1-HCT116-NC细胞(P<0.05);HCT15、HCT116细胞转染后的蛋白表达均低于阴性对照;4μg/mL时,HCT15和HCT116细胞转染siRNA-Ambra1-1、siRNA-Ambra1-2后的细胞克隆形成数均少于0μg/mL(P<0.05),而且HCT15、HCT116细胞转染siRNA-Ambra1-1、siRNA-Ambra1-2后的细胞克隆形成数均分别少于siRNA-Ambra1-HCT15-NC、siRNA-Ambra1-HCT116-NC(P<0.05);HCT15、HCT116细胞转染siRNA-Ambra1-1、siRNA-Ambra1-2后的细胞生存率均分别低于siRNA-Ambra1-HCT15-NC、siRNA-Ambra1-HCT116-NC(P<0.05);且随着药物浓度增加,已转染了siRNA-Ambra1的细胞生存率均低于阴性对照组.结论:沉默Ambral基因可提高大肠癌细胞对5-FU的化疗敏感性.