海洋芽孢杆菌Bacillus sp.CAMT22370所产葡萄糖氧化酶的分离纯化与表征

摘要

前期筛选获得一株海洋源Bacillus sp.CAMT22370高产葡萄糖氧化酶菌株,本研究进一步通过离子交换及分子筛层析使Bacillussp.CAMT22370葡萄糖氧化酶纯化了2.12倍,酶活得率32.37％,比活力达到8.47 U/mg,分子质量约为50 kDa.酶学特性研究表明,此酶在低温下有较好的催化活性,最适温度为30℃,超过30℃时酶活迅速下降,45℃保温2 h活力降至75％左右;最适pH为6.0,在5.0以下和7.0以上时酶活迅速降低,9.0时损失35％;Ca2+和Mn2+有明显激活作用,Na+和Zn2+有轻微激活作用,K+和Mg2+对酶活无显著影响,而Fe2+、Fe3+和Cu2+对酶活有明显抑制作用,酶动力学参数Vmax及Km值分别为26.85(μmol/(L·min))和109.26(μmol/(L·min)),以上酶学特性与现有酶制剂存在明显不同,研究结果为该葡萄糖氧化酶的开发利用奠定了初步基础.