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亚硫酸盐还原酶的分离纯化和酶学性质的研究

         

摘要

采用硫酸铵盐析、Sephadex G-100凝胶过滤、DEAE-52纤维素柱层析一系列纯化步骤,得到电泳纯的亚硫酸盐还原酶,纯化倍数为115.30,酶回收率为18.36%.用SDS-PAGE测得亚基相对分子质量为66 kDa.酶反应的最适温度和pH分别为30℃和7.7.热稳定性较好,80℃时酶活仍能维持在55%左右.在pH 4~10之间均较稳定,残余酶活均在60%以上.Fe3+,Zn2+,Cu2+,Mn2+,Co2+对亚硫酸盐还原酶有明显的抑制作用,Ca2+,Zn2+Ag+,Fe2+对亚硫酸盐还原酶有轻微的抑制作用,其他离子在实验浓度范围内对酶活无明显影响.以亚硫酸钠为底物,该酶的Km为1.23 mmol/L,Vmax为6.80 u/mL.

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