大鼠尾椎间盘不同切片方式及染色方法的组织学观察比较

摘要

目的 比较大鼠尾椎间盘不同切片方式及染色方法的优缺点,为相应的临床诊断及实验研究奠定理论基础.方法 收集SD大鼠尾椎间盘,制成冷冻切片及石蜡切片后,分别行苏木精-伊红染色(HE染色)、番红-固绿染色、Masson染色、甲苯胺蓝染色,以及针对一型胶原蛋白(type Ⅰ collagen,COL-Ⅰ)、二型胶原蛋白(type Ⅱ collagen,COL-Ⅱ)和糖胺聚糖(glycosaminoglycan,GAG)的免疫荧光染色,对比观察椎间盘各层组织形态及蛋白表达的情况.结果 在染色方法中,石蜡切片HE染色能清晰显示各层组织;Masson染色能清晰显示纤维环组织及髓核组织;番红-固绿染色及甲苯胺蓝染色能较好地显示软骨各层及软骨下骨结构.冷冻切片的免疫荧光染色中,纤维环组织的胶原蛋白多为COL-Ⅰ,髓核组织中胶原蛋白多为COL-Ⅱ,而GAG多由髓核细胞及髓核样细胞分泌.结论 观察椎间盘各层组织时,选用HE染色及Masson染色等染色,其中石蜡切片优于冷冻切片;观察椎间盘各种蛋白的表达及分布时,选用免疫荧光染色,其中冷冻切片优于石蜡切片.