慢病毒介导的低表达FTH前列腺癌稳转细胞株的构建及功能分析

摘要

目的构建并鉴定慢病毒介导的低表达铁蛋白重链(FTH)的前列腺癌PC-3M稳转细胞株,为深入探讨FTH在前列腺癌中的作用机制提供理论依据。方法感染实验分为3组:空白对照组(未经处理的PC-3M细胞),阴性对照组(感染NC病毒),LV-shFTH组(感染sh FTH病毒)。运用慢病毒感染PC-3M细胞获得稳定的低表达FTH的细胞株,利用Western blot方法检测稳定细胞株中FTH的表达水平,平板克隆形成法检测稳转细胞的增殖能力,Transwell实验检测稳转细胞迁移能力。结果通过嘌呤霉素的筛选,成功获得了稳定低表达FTH的细胞株。与对照组细胞相比,低表达FTH的细胞增殖慢,迁移率低。结论成功构建低表达FTH的PC-3M稳转细胞株,为后期验证FTH的生物学功能奠定了物质基础。