淫羊藿素通过抑制BACE1阻断APP-PS1-HEK293细胞中淀粉样蛋白生成

摘要

目的探讨淫羊藿素(ICT)通过抑制β位淀粉样前体蛋白裂解酶1(BACE1)对β-淀粉样蛋白(Aβ)生成的影响。方法使用APP-PS1-HEK293细胞,加入0.1～100μmol/LI CT进行干预。采用荧光共振能量转移技术(FRET)检测IC_(50);MTT及LDH检测细胞活力及毒性;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测Aβ_(1-40)浓度,免疫荧光法检测BACE1的表达;Western blot检测BACE1、早老素蛋白1(PS1)、解整合素金属蛋白酶10(ADAM10)和Aβ_(1-40)的表达。结果 ICT以浓度依赖性方式抑制BACE1的活性,IC_(50)为5.70±1.09μmol/L。当ICT浓度为(5～10μmol/L)时,APP-PS1-HEK293细胞的活力增加,LDH漏出率下降;与对照组相比,细胞内Aβ_(1-40)含量高于细胞外,ICT对两者均有降低作用;BACE1、PS1的蛋白表达显著降低,ADAM10表达升高。结论 ICT具有抗Aβ生成的作用,其机制可能与抑制BACE1有关。