TAT-DV3-Bcl-2siRNA促进U251胶质瘤细胞凋亡的研究

摘要

目的 设计合成肿瘤靶向穿膜肽TAT-DV3,联合Bcl-2 siRNA,体外实验研究其对U251胶质瘤细胞的作用.方法 设计合成特异性Bcl-2 siRNA及靶向肽TAT-DV3,利用静电作用使两者结合.体外培养U251胶质瘤细胞,TAT-DV3-Bcl-2 siRNA复合物处理细胞后,激光共聚焦显微镜追踪Bcl-2 siRNA进入细胞的分布.PCR检测靶基因Bcl-2沉默情况,Western blot检测Bcl-2蛋白表达;Annexin-V FITC与PI联合标记细胞后,流式细胞仪检测细胞凋亡.结果 激光共聚焦显微镜结果证明TAT-DV3-Bcl-2 siRNA成功进入U251细胞内.PCR及Western blot验证了TAT-DV3-Bcl-2 siRNA沉默了目标基因Bcl-2.利用流式细胞仪进行凋亡检测,发现与对照组相比TAT-DV3-Bcl-2 siRNA可以显著促进U251细胞凋亡.结论 靶向肽TAT-DV3可有效投递Bcl-2 siRNA进入U251胶质瘤细胞,通过降解Bcl-2 mRNA抑制Bcl-2的表达并促进胶质瘤细胞的凋亡.