sirt2基因高表达对人脐带间充质干细胞衰老的抑制作用

摘要

目的:观察sirt2基因高表达对人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)衰老的影响.方法:扩增人sirt2ORF序列,利用腺病毒载体构建sirt2基因高表达的重组腺病毒(pAd-sirt2),空斑法测定病毒滴度;感染hUC-MSCs,倒置荧光显微镜下观察荧光表达情况;实验分为P3组(第3代hUC-MSCs)、P15组(第15代hUC-MSCs)和感染组(用pAd-sirt2腺病毒感染第15代hUC-MSCs),CCK-8检测细胞增殖情况,流式细胞术分析细胞周期变化,β-半乳糖苷酶染色后检测阳性细胞率.结果:成功制备pAd-sirt2重组腺病毒,病毒滴度为1.8×1011 pfu/L;荧光观察证实Sirt2蛋白在hUC-MSCs中有效表达;与P15组相比,sirt2高表达可促进hUC-MSCs增殖,并将细胞周期阻滞在S期,β-半乳糖苷酶阳性细胞率降低(P均＜0.05).结论:sirt2基因高表达可促进hUC-MSCs增殖,延长细胞周期,并有效抑制hUC-MSCs的衰老.